Jorge Canese¹, Pasionaria Ramos ^1,2, Alicia Silva¹, Juana Pavón¹, Nimia Delgado¹, Mirna Dominguez², Nilsa Sanchez².

1. Cátedra de Microbiología. Facultad de Ciencias Medicas. Universidad Nacional de Asunción. Asunción. Paraguay.
2. Laboratorio de Microbiología de Alimentos. Municipalidad de Asunción. Asunción. Paraguay.

Con el objetivo de establecer la calidad microbiológica de líquidos de máquinas hemodializadoras, se realizó un estudio en centros asistenciales públicos y privados de Asunción. Se tomaron 60 muestras y se realizaron diluciones sucesivas del líquido obtenido, que fueron sembradas en agar Plate count, en Caldo acetamida y verde de malaquita.

De las 60 muestras analizadas 35(58,3%), presentaron recuentos mayores a los establecidos. Con relación al recuento bacteriológico de los líquidos de entrada y salida presentaron recuentos mayores a los establecidos en 17 (56,7%) y 18 (60%) casos respectivamente. No se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los líquidos de entrada y salida. Se aislaron Pseudomonas aeruginosa en 52 (86,7%) de las 60 muestras analizadas, en 21 casos en los líquidos de entrada y en 30 de los líquidos de salida. Es importante realizar un control microbiológico, lavado y desinfección de las maquinas dializadoras así como del liquido utilizado en la diálisis, a fin de evitar infecciones en los pacientes que las utilizan.

PALABRAS CLAVES: diálisis, contaminación, Pseudomonas aeruginosa, agua

In order to stablish the microbiological quality of liquids in hemodialisys machines, a research was made in public and private health centers in Asunción, Paraguay. About 60 samples were taken and successive dilutions of the liquid were made, sown in agar Plate count, Acetamide and green malaquita.

From the 60 analyzed samples 35 (58,3%), presented counts over standards values. Bacteriological counts from liquid of the tubes going in and out the machine got counts over standards, 17 (56,7%) and 18 (60%) cases respectively. No significative difference was observed between the tubes going in and out. Pseudomonas aeruginosa were isolated in 52 (86,7%) of the 60 samples analyzed, and in 21 cases from liquid of the tubes going in and out. It is important to perform microbiological control, washed and desinfection of dialysis machines and the dialysis water, to avoid infections in patients who use them.

KEYWORDS: dialysis, contamination, Pseudomonas aeruginosa, water.

La hemodiálisis es la utilización de una membrana artificial, contenida en una estructura rígida (dializador), para dar paso al agua y toxinas desde la sangre al líquido de diálisis.

El líquido de diálisis es la mezcla de una parte de solución comercial y agua tratada.

El líquido de diálisis no es estéril, y las dimensiones de los virus y bacterias son mayores que el diámetro de los poros de la membrana del filtro de hemodiálisis y no la atraviesan. Dado que el líquido de diálisis no es estéril, puede ocurrir el fenómeno de retrofiltración del líquido dializado al compartimiento sanguíneo, ocasionando la contaminación del circuito extracorpóreo con la aparición de reacciones pirógenas o la producción de procesos sépticos (1).

Para la mayor seguridad de los pacientes hemodializados, el líquido de diálisis debe cultivarse mensualmente y las cuentas totales no deben exceder de 200 a 2000 UFC/ml (4).

El objetivo del trabajo fue establecer la calidad microbiológica de líquidos máquinas hemodializadoras de centros asistenciales públicos y privados de Asunción.

Se evaluaron 60 muestras de líquidos de diálisis obtenidos una de entrada y otra de salida de 30 máquinas hemodializadoras de centros asistenciales públicos y privados, en el período comprendido entre noviembre de 1977 a enero de 1998.

El volumen tomado fue de aproximadamente de 100 ml, que fueron transportados refrigerados hasta su procesamiento. Para el recuento de gérmenes totales fue utilizado el método de contaje de colonias establecidas por la American Public Health Association, que consiste en diluciones sucesivas utilizando agua peptona 0,1% y agar plate count, con siembra en profundidad, incubados a 35º C por 48 hs.

Para la presencia de Pseudomonas aeruginosa se tomaron 10 ml doble concentración de Caldo verde de malaquita y de Caldo Acetamida, incubados a 35º C por 48 hs. y subcultivados en Agar CN. Las colonias sospechosas fueron confirmadas por pruebas bioquímicas, y probadas su sensibilidad por el antibiograma, según el método de Kirby-Bauer.

De las 60 muestras analizadas 35 (58,3%), presentaron recuentos mayores a los establecidos (mayor a 200 ufc/ml para el agua tratada y 2000 ufc /ml para el dializado) (4). En 40%(14/35) de las muestras, el agua había sido previamente tratada. Con relación al recuento bacteriológico de los líquidos de entrada y salida presentaron recuentos mayores a los establecidos en 17 (56,7%) y 18 (60%) casos respectivamente. No se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los líquidos de entrada y salida.

Se aislaron Pseudomonas aeruginosa en 52 (86,7%) de las 60 muestras analizadas, en 21 casos en los líquidos de entrada y en 30 de los líquidos de salida.

Se comprobó una correlación entre alto recuento bacteriológico y presencia de Pseudomonas aeruginosa en 29 (82,9%) de 35 muestras analizadas.

En cuanto a las sensibilidad de Pseudomonas aeruginosa, resultaron 100 % sensibles a Amikacina, Ciprofloxacina, Imipenen, Piperacilina, y 95,7 % a la ceftacidima y 93,% a la cefoperazona.

La contaminación química y bacteriana del líquido de dialisis constituyen un importante problema en la terapia de hemodiálisis y puede ser causada por el agua usada en la preparación de la diálisis (6)

Llama la atención el porcentaje de muestras con un elevado recuento bacteriológico encontrado, ya que la misma presenta sus riesgos tales como la producción de bacteriemias, sepsis graves y shock séptico en individuos susceptibles a adquirirlas. El elevado porcentaje de muestras positivas en centros asistenciales que tratan previamente el agua para diálisis se debería al mayor número de muestras obtenidas en tal sitio o estaría afectada por la distancia recorrida del agua tratada hasta llegar al aparato de diálisis permaneciendo por tanto más tiempo dentro del sistema de distribución.

Los microorganismos causantes de infecciones intrahospitalarias son variados entre ellos encontramos a: Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter sp., Salmonella sp., Flavobacterium sp., Citrobacter sp., Klebsiella sp., Serratia sp., Corynebacterium sp., Candida sp., y Estafilococos coagulasa positivos y negativos (3). Dentro de estos microorganismos Pseudomonas aeruginosa juega un papel fundamental por su prevalencia de colonización en personas hospitalizadas, por su papel como patógeno oportunista eficaz. La humedad es un factor crítico en los reservorios hospitalarios de Pseudomonas aeruginosa equipo respiratorio, soluciones de limpieza, medicinas, desinfectantes, piletas, pues sus necesidades nutritivas son mínimas y persiste en el ambiente por períodos prolongados. Los pacientes susceptibles a ella son aquellos que poseen quemaduras extensas, enfermedad maligna, fibrosis químicas, leucopenia, antibioticoterapia previa con antibióticos de amplio espectro, monitoreo vascular, uso de quipos respiratorios, manipulación del tracto urinario o cateterismo prolongado, transplante de órganos, diálisis peritoneal e internación prolongada (5).

La presencia de Pseudomonas aeruginosa en el 82,9 % de las muestras exige la toma de medidas necesarias, ya que este es un patógeno oportunista que tolera una amplia variedad de condiciones físicas y de temperatura que contribuyen a su éxito ecológico. Con respecto a la sensibilidad, las cepas demostraron ser mucho más sensibles de lo que refiere la literatura, para este mismo microorganismo, quizás, porque las mismas son cepas ambientales. Estudios semejantes revelaron la presencia de Pseudomonas aeruginosa en 22 % del agua tratada y 59% en las muestras del dializado (2)

Se puede observar que los recuentos no varían mucho en relación con el recorrido del líquido por el sistema extracorpóreo y antes de él, pudiendo definirse así que el control previo del agua de diálisis reduciría el recuento bacteriológico de los mismos.

Por lo dicho anteriormente y para evitar la contaminación bacteriana se recomienda un control bacteriológico constante, así como el lavado y desinfección periódico del sistema de distribución del agua y de la máquina de diálisis (6). De esta manera se estaría evitando un factor de riesgo importante para una probable infección en los pacientes dializados.